高效液相色谱柱性能影响因素有很多，例如，硅胶纯度、色谱柱尺寸、颗粒形状、粒径、表面积、孔径，化学性质包括键合类型、碳覆盖率、封端，在选择高效液相色谱柱之前，先多了解自己的样品和杂质，他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。1.样品是极性的且弱酸性的;就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测，即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱。2.如果样品极性太强，或酸性太强;可以选择CN，NH2，或硅胶柱，HILIC(亲水色谱)，也有使用C18+强阴离子对试剂...

高效液相色谱柱的键合基质分为硅胶基质、聚合物基质等，其中硅胶基质应用较为广泛，其特点主要包括以下3方面：(1)低pH值，硅胶键合键容易水解(pH8)。(2)在接近中性的条件时，硅醇基裸露，显酸性，不适宜分离碱性化合物。(3)某些硅胶被一定金属污染，这些金属会引起峰的不对称或拖尾，甚至化合物的死吸附。高效液相色谱柱的硅胶基质可分为全多孔硅胶微粒、杂化硅胶颗粒和实心核硅胶颗粒。1、全多孔硅胶基质：全多孔硅胶，以其全多孔的结构特点具有很高的比表面积，故具有很高的柱效。其机械强度大的...

反相色谱是迄今在高效液相色谱中应用*泛的技术，主要是因为它适用于分析绝大多数的非极性物质和很多的可离子化的及离子化合物。如果污染是因为重复进样时强保留物质的累积引起的，利用简单的清洗步骤来除去这些污染物往往就能恢复其色谱性能。经过等度运行后的高效液相色谱柱，有时用90～100%含量的溶剂B(双溶剂反相系统中洗脱能力较强的溶剂，如甲醇、乙晴、四氢呋喃等)冲洗20个柱体积可以清除污染物(色谱柱的柱体积和空柱管体积概念不同，一根4.6x250mm柱子的柱体积只有2.5ml，2.1x...

液相色谱柱是液相色谱分离能力的核心部分，其化学性质参数包括以下几个方面：1、硅胶基质硅胶基质是通用的基质，强度大，化学修饰容易，但使用的pH值范围有限(一般为2—8，特殊修饰的可以达到1—12)。2、聚合物基质聚合物基质多为聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂，化学稳定，应用pH范围宽，具有更强的疏水性，对蛋白质等样品分离效果较好;但强度较小，有机溶剂可能导致聚合物溶胀而受损，批次重复性较差，商品化色谱柱不多，一般价格较贵。3、载碳量载碳量是基质表面键合相的比例，载碳量高，则...

离子色谱柱是一种用来改善在反相色谱中保留较差的强极性物质保留行为的色谱技术。它通过采用强极性固定性，并且结合高比例有机相/低比例水相组成的流动相来实现这一目的。而这样的流动相组成尤其有利于提高电喷雾离子化质谱的灵敏度。离子色谱柱的分离机制：分离机理在目前还存在着争议，主要包括以下三个方面：(1)分配机理(2)离子交换(3)偶极-偶极相互作用。更多的试验现象则表明HILIC色谱柱的保留机理包含氢键作用、偶极作用和静电作用等多种次级效应，很难将其区分开来。影响离子色谱柱保留的主要...

色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。在做柱性能测试时要按照色谱柱出厂报告中的条件进行，只有这样，测得的结果才有可比性。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同。样品的前处理过程：(1)最好使用流动相溶解样品。(2)使用预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。(3)使用0.45μm或0.22μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。实际使用中，液相色谱柱有可能会失效，常见的原因有：1、色谱柱...

使用高效液相色谱柱做HPLC分析时，通常会遇到色谱柱柱压过高等情况，色谱柱柱压过高原因何在?怎么解决呢?高效液相色谱柱柱压高原因与解决方法：色谱柱柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因：1、拆去保护柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查2、把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查3、将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱...