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7-29
固相萃取就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的。固相萃取具有如下优点:(1)高的回收率和高的富集倍数。大多数固相萃取体系的回收率较高,可达70%~100%;另外,固相萃取的富集倍数一般很高,很多体系很容易就能达到几百倍,少数体系甚至能达到几千或几万倍,这是一般传统分离富集方法很难达到的。(2)使用的高纯有毒有机溶剂量很少,减少了对环境的污染,是一种对环境友好的分离富集方法;另...
7-23
赛默飞色谱柱选择时要掌握色谱柱的主要关键参数,色谱柱的保护,色谱分析理论以及色谱柱的分类等知识,分析工作者才能做到在工作开展时一针见血的选择色谱柱,有的放失的开发方法,后心中有数的完成分析工作。赛默飞色谱柱的关键参数有固定相、内径,长度和液膜的厚度。1)固定相固定相由固体吸附剂或涂有固定液的担体构成。担体是一种多孔性化学惰性固体,用来支撑固定液。担体的特性是表面积大、有化学惰性、热稳定性,孔隙结构和浸润性。担体分为一般分硅藻土和非硅藻土两大类。固定相一般是具有活性的多孔性固体...
7-14
在高效液相色谱分析系统中,对温度控制的要求越来越高,药典及诸多新的分析方法,也对柱温给出条件,由于恒温箱可以精确、稳定的控制使用温度,对于提高柱效。使Acclaim色谱柱成为高效液相色谱仪的重要配套装置。以高纯度具有良好稳定性的硅胶为基质,通过严格控制单分子层形成以及封尾的化学反应条件,可确保柱与柱之间有着可靠的重现性。该填料为均一的球形颗粒,通过运用的匀浆装填技术装填得到的色谱柱,柱床密度均一稳定,可保证具有的柱效。Acclaim色谱柱使用的三个使用要点:1.Acclaim...
6-29
免疫亲和柱是利用抗原抗体特异性可逆结合特性的SPE技术,根据抗原抗体的高选择性,从复杂的待测样品中提取目标化合物。免疫亲和层析常见的用途是纯化重组蛋白。免疫亲和层析是从粗混合物中纯化蛋白质或核酸理想选择。如果蛋白质的分子量,疏水性,电荷等未知,亲和色谱法仍可适用于这种情况。一个典型例子是尝试分离具有特定活性的酶时,可以用与所选底物相似或相同的连接配体构建亲和柱。免疫亲和柱的使用要点:1、上柱的样品溶液应该保持酸碱中性、无悬浮物、甲醇浓度不宜过高;2、若样品为复杂样品,例如高蛋...
6-22
选择合适的岛津色谱柱可以缩短方法开发所需的时间,并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多,不同类型的色谱柱分离对象不同,因此,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。因为岛津色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。浅析影响岛津色谱柱使用寿命的因素:1.流动相pH不同基质的填料具有不同的pH适用范围。常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为100mg·L-1,且在pH1~9的范围内溶解的硅胶量...
6-12
MonoTower色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。MonoTower色谱柱利用先将混合物分离,然后利用检测器依次检测已分离出来的组分。色谱柱的直径为数毫米,其中填充有固体吸附剂或液体溶剂,所填充的吸附剂或溶剂称为固定相。与固定相相对应的还有一个流动相。流动相是一种与样品和固定相都不发生反应的气体,一般为氮或氢气。待分析的样品在色谱柱顶端注入流动相,流动相带着样品进入色谱柱,故流动相又...
5-28
气相色谱柱做为气相色谱仪的核心,是做实验分析常用的色谱耗材,除用于定量和定性分析外,还能测定样品在固定相上的分配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数。气相色谱柱应该如何选择适合的膜厚度?膜的厚度对所分析化合物的溶解性有比较大影响,因此,正确选择膜的厚度与正确选择柱长同样重要。相比率是表示色谱柱固定相多少的一种方式,相比率是指毛细管柱的内部体积与固定相的体积比。相比率(β)用公式可表示为:β=D/4μf式中:D=柱内径(微米)μf=固定相厚度较高的相比率色谱柱内固定相...
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